HPLC분석관련
분석시료의 특성에 따른 분리모드
HPLC를 사용하기에 앞서 분리모드를 선택해야 합니다. 분리 모드의 선택이란 컬럼을 어떤 것을 사용하느냐를 정하는 것과 같습니다. 보통은 다음의 그림에서 보는바와 같이 분리하고자 하는 물질에 따라 분리 모드를 선택합니다.
물질의 간단한 특성(수용성, 지용성)에서부터 물질의 형태에 따른 분리모드의 선택을 통해 HPLC컬럼을 선정하게 됩니다. 보통은 역상모드를 많이 사용하게 되는데요. 사용하는 용매가 극성이기 때문에 물이나 메탄올, Acetonitrile같은 비교적 냄새가 적고 작업하기 편리한 이동상을 사용합니다.
역상크로마토그래피는 다양한 작용기를 가지고 있어 물질별로 가장 적합한 컬럼을 선택할 수 있습니다. 이 중에서도 C18컬럼이 가장 많이 사용되는데요. 같은 회사라고 하더라도 굉장히 다양한 종류의 C18컬럼을 보유하고 있습니다. 아래 그림에서는 관능기(작용기)의 종류에 따른 특성을 표로 나타낸 것인데요. 탄소의 수가 늘어나면 소수성과 평면인식능력은 좋아지지만 수소결합성은 떨어지는 것을 확인할 수 있습니다. 내가 분석하고자 하는 물질들이 어떤 영역에 속하는 지 확인하고 컬럼을 선택하여야 쉽게 물질 분리를 진행할 수 있습니다.
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