Manual
[사용설명서] YMC-UltraHT Series
사 용 설 명 서
YMC-UltraHT Series
① 머리말
항상 저희 HPLC용 충전 Column YMC-UltraHT Series를 이용해주셔서 대단히 감사 드립니다.
YMC-UltraHT Series는, 새로 개발 된 입자경2㎛고순도 Silica gel기재를 이용한 초고속 분석에 적합한 ODS Column입니다. 기존의5㎛나3㎛입자 충전 Column과 비교하여 높은 선유속과 압력영역에서 뛰어난 분리능을 가지기 때문에 분리능이 떨어지지 않으며, 분석 시간을 대폭 줄일 수 있습니다. 당사는 YMC-UltraHT Series 제조에 있어서 엄격한 품질관리를 하고 있으며 일정한 품질의 제품을 고객님께 전달해 드리고 있습니다. (검사 성적서 「COLUMN INSPECTION REPORT」를 참조하여 주십시오) 전달해 드린 Column의 성능을 충분히 발휘시켜 오랫동안 사용해 주시기 위해서 본 사용설명서를 충분히 읽으신 후, 올바르게 사용해 주시도록 부탁 드리겠습니다.
② Column 연결및시스템설정상주의점
・ Column 연결 사양은 Waters 연결 호환 사양입니다. 배관 접속부분에 공극이 있으면 누액이나 Column성능(이론단수, Peak 대칭성) 저하의 원인이 됩니다. 공극이 생기지 않도록 배관의 Ferrule 끝면과 절단면에 주의하여 주십시오..
・ 내경2 mm Column을 사용하는 경우, 시스템 유로에서의 시료 확산(Column외 확산)이 일어나면 Column 성능에 크게 영향을 끼칠 수 있습니다. 하단과 같이 HPLC 시스템 사용 환경을 최적화하여 주십시오. 3 mm내경의 Column은 표준 분석용 HPLC 시스템에서 사용할 수 있습니다만, 동일하게 시스템내부의 확산을 줄여준다면 보다 높은 Column 성능을 기대할 수 있습니다..
1) Injector~Column간, Column~검출기 간의 배관은 가능한 한 짧고, 내경이 작은(0.15 mm이하) 것을 이용하며, 접속 부분에 공극이 생기지 않게 주의하여 주십시오.
2) 검출기 Flow-cell은 Semi-micro용 또는 Micro용 등, 저용량 타입을 사용하여 주십시오.
3) Injecter는 Semi-micro 또는 Micro용을 사용하며 Sample Roof를 최소화 시켜 주십시오.
・ 보관 유지가 짧고 샤프한 PEAK에 대응할 수 있도록 검출기의 Response나 데이터 처리 장치의 데이터 Sampling 속도를 최적화시켜 주십시오.. Response는 0.1 sec 이하, 데이터 샘플링 속도는 10 points/sec 이상을 기준으로 하여 주십시오.
③ 용리액및시료용액
・ Column 출하 시 봉입용매는 Acetonitrile /물(60/40)입니다. Column을 장기간 보관할 경우에도 이 용매로 치환하여 주십시오.
・ Flow방향은 Column 라벨에 표시된 화살표 방향입니다.
・ 수계에서 비수계 용매까지 사용가능 하지만, 극성이 완전히 다른 용매간의 치환을 반복하게 되면 Column 성능이 저하될 우려가 있습니다. 사용 가능한 일반적인 유기용매는 Acetonitrile, Methanol, THF 등 입니다.
・ 용리액은 통상pH 2.0에서8.0의 범위에서 조제하여 주십시오. pH한계부근에서는10%이상의 유기용매를 포함한 용리액을 사용하여 주십시오. 또한pH한계부근에서는 온도나 용리액 조성 등 조건에 의해 Column 수명이 짧아질 수 있습니다.
・ 용리액을 치환 하는 경우, 유기용매와 같이 혼화성과 염 석출에 주의하여 주십시오. 또한 시료나 시료용매가 포함된 염류가 Column 내에서 석출되지 않도록 용리액의 혼화성을 확인한 후 주입하여 주십시오.
・ 시료는 가능한 한 초기용리액과 동일 조성의 용매에 용해해 주십시오. 용리액보다 용출력이 높은 용매에 용해했을 경우, Peak가 Broad되어 분리능이나 재현성이 저하될 수 있습니다.
・ 로딩에 의한 압력 상승을 막기 위해서 용리액 및 시료 용액은 미리 0.2㎛ 이하의membrane filter 로 여과시켜 주십시오..
④ Column 세정(일반적방법)
・ 용리액에 완충액이나 염류가 포함되지 않은 경우, 용리액을 구성하는 유기용매의 농도를 높여 Column에 잔존력이 큰 물질을 세정시켜 주십시오. 유기용매는100%까지 사용할 수 있습니다. 특히 지용성이 높은 성분이 흡착하고 있는 경우, THF를 첨가하면 효과적인 경우도 있습니다.
・ 완충액이나 염류가 포함된 용리액을 사용하시는 경우, 이러한 것들이 포함되지 않는 물/유기용매 혼합액(용리액과 동등 비율)에 일단 치환한 후, 상기와 동일하게 세정시켜 주십시오. 100 mM정도의 완충액이나 염류일 경우, 약60% Acetonitrile 수용액에 직접 치환할 수 있습니다.
・ pH한계부근에서 사용 후에 물만으로 세정하게 되면 Column열화를 일으키는 경우가 있습니다. 물/유기용매 혼합액이나60% Acetonitrile 수용액으로 세정하여 주십시오.
・ 단백질이나 다당류 등의 고분자 화합물이 Column에 흡착했을 경우에는 세정으로만 제거하기 어렵습니다. 이러한 협잡물이 포함된 시료의 경우 미리 전처리를 권장 드립니다.
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⑤ 그외환경
・ Column 압력은 길이50 mm이상이50 MPa정도, 길이30 mm가 40 MPa정도를 상한으로 하여 주십시오.
・ Column 온도의 상한은50℃입니다. 다만, 용리액의 pH 등 조건에 의해 Column 수명에 영향을 주는 경우가 있습니다. 통상 20℃에서 40℃ 사이에서 사용하여 주십시오.