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Clopidogrel의 분석 (JP;일본약전에 따라)
소개
Clopidogrel을 이용한 Sanofi-Aventis의 약품 플라빅스(Plavix). 이 성분은 혈액응고를 방지하여 혈전예방 및 심장마비예방에 사용되고 있습니다. 뿐만 아니라 Bristo-Myers Squibb의 Iscover 로도 알려져 있습니다. 국제 일반명 (INN) 클로피도그렐(clopidogrel)은 여러 회사들에서 판매되고 있는데 앞에서 언급한 회사들은 중황산염(Bisulfate)으로 판매되고 있고, 타 회사 제품은 염산염(hydrochloride)으로 판매(Hexal, Teva)되거나 베실산염(besilate)으로 판매(Ratiopharm)되고 있습니다. Clopidogrel은 물에 녹았을 때 pH가 산성(pH 1)을 띱니다. 메탄올에 잘 녹으며, 두개의 enantiomer를 가지고 있습니다. S 폼만 사용됩니다.
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회사 |
제품명 |
성분명 |
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사노피 (Sanofi) |
플라빅스 (Plavix) |
Clopidogrel sulfate |
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브리스톨마이어스스큅 (Bristol-Myers Squipp) |
이스코버 (Iscover) |
Clopidogrel sulfate |
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테바 (Teva) |
클로피도그렐 (Clopidogrel) |
Clopidogrel hydrochloride |
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헥살 (Hexal) |
클로피도그렐 HCl (Clopidogrel HCl) |
Clopidogrel hydrochloride |
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레티오팜 (Ratiopharm) |
클로피도그렐 (Clopidogrel) |
Clopidogrel besilate |
분석
YMC는 일본약전(JP)의 방법을 통해 clopidogrel의 분석연구를 진행했습니다. 분석대상물의 농도나 분석 파라미터(이동상, 유속, 온도)는 JP의 내용대로 수행했으며, Method를 변경하지 않았습니다. 결과 표준 셋트 (시스템적합성)는 YMC Pack Pro C18의 분석결과를 통해 비교하였습니다.
첫번째 분석으로 0.126mg/ml 용액을 사용하였습니다. 적절한 분석 파라미터는 다음 크로마토그램에 나열하였습니다. 유속은 clopidogrel sulfate가 8분대에 위치하도록 조정되었습니다. 다음의 표에서 최소 요구사항들은 JP에 따라 결과 비교를 수행한 것입니다. 이론단수는 JP 에 따라 결과를 비교했을 때 가뿐히 통과하였습니다. 또한 tailing factor와 peak 면적의 표준편차는 JP 요구사항에 비해 월등히 좋은 결과를 보였습니다.
Standard solution: 0.126 mg / mL clopidogrel sulfate.
Column: YMC-Pack Pro C18 (5 ㎛, 12 nm) 150 x 4.0 mm
Eluent: A: buffer (pH 2.5; Sodium pentasulfonate + phosphoric acid) / methanol (19/1);
B: acetonitrile / methanol (19/1);
A / B (3/2)
Flow rate: 1.1 mL / min
Temperature: 30 ° C
Detection: UV at 220 nm
Injection: 10 ㎕
요구사항 |
결과 |
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이론단수 |
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Tailing Factor |
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Peak면적의 표준편차 |
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두번째 분석에서, clopidogrel (연구용 시약 및 clopidogrel 타블렛)을 내부표준물 isopropy benzoate(2)와 같이 HPLC컬럼에 주입하였습니다. 모든 파라미터는 JP 기준으로 진행하였고, 결과는 최소요구사항과 비교하였습니다 (표참조). YMC-Pack Pro C18은 양쪽의 시험에서 분리능을 만족시켰고 (13.1 ≥ 4), peak면적의 표준편차도 마찬가지로 만족시켰습니다(0.12% ≤ 1.0%) 요구사항과 비교하여 특히 좋은 결과를 얻을 수 있었습니다.
윗쪽 : clopidogrel sulfate (연구용시약)
아랫쪽: clopidogrel sulfate 타블렛
Solution: 0.133 mg / mL isopropyl benzoate 0.1 mg / mL clopidogrel sulfate.
Column: YMC-Pack Pro C18 (5 ㎛, 12 nm) 150 x 4.0 mm
Eluent: A: Buffer (pH 2.5; sodium pentasulfonate + Phosphoric acid) / methanol (19/1);
B: acetonitrile / methanol (19/1);
A / B (3/2)
Flow rate: 1.1 mL / min
Temperature: 30 ° C
Detection: UV at 220 nm
Injection: 10 ㎕
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시스템적합성 요구사항 |
결과 |
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분리능 (Resolution (2,1)) |
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Peak면적의 표준편차의 비 (2, 1) |
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세 번째 분석은 clopidogrel sulfate의 농도를 다르게 하여 두 번 주입하고 크로마토그램을 얻은 것입니다. 이전 method와 이번 분석의 차이는 용제조성의 변화 즉, gradient method를 사용한 것입니다. 다음 표의 결과는 희석된 샘플의 크로마토그램(윗쪽)을 기초로 한 것입니다. 결과의 주요포인트는 요구사항에 비해 매우 좋은 수치를 보인 것입니다. 이론단수는 2.5배 높으며, 최적화된 peak symmetry로 tailing factor가 0.97(기준 ≤ 2), peak면적 표준편차는 0.3%로 기준인 1%에 비해 매우 좋은 수치를 보였습니다. 두번째 크로마토그램에서 샘플분석에서 매우 적은 양의 불순물이 잘 분리되었는지 보여주고 있습니다.
윗쪽: clopidogrel 6.5 ug / mL
아랫쪽: clopidogrel 6.5 mg / mL
Column: YMC-Pack Pro C18 (5 microns, 12 nm) 150 x 4.0 mm
Eluent: A: Aqueous saline (pH 2.5; Sodium pentasulfonate
+ Phosphoric acid) / methanol (19/1);
B: acetonitrile / methanol (19/1);
10.5% B (0-3 min), 10.5-68.5% B (3-48 min), 68.5% B
(48-68 min)
Flow rate: 1.0 mL / min
Temperature: 30 ° C
Detection: UV at 220 nm
Injection: 10 ㎕
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시스템적합성 요구사항 |
결과 |
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이론단수 |
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Tailing Factor |
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Peak 면적 표준편차 |
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요약
YMC Pack Pro C18을 이용하여 얻은 크로마토그래피 데이터는 Clopidogrel sulfate의 분석에 매우 적합함을 알 수 있습니다. 이론단수는 요구사항에 적합할 뿐만 아니라 매우 높은 수준이었고, peak symmetry가 좋으며 (tailing factor), 정확성이 뛰어난(peak 면적 표준편차) 그리고 분리능은 아주 뛰어난 성적을 보여주었습니다.
YMC Pack Pro C18에 대한 정보나 clopidogrel에 대한 자료를 원하시면
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제 50조 (영리목적의 광고성 정보 전송 제한)
- 1.누구든지 전자적 전송매체를 이용하여 영리목적의 광고성 정보를 전송하려면 그 수신자의 명시적인 사전 동의를 받아야 한다. 다만, 다음 각 호의 어느 하나에 해당하는 경우에는 사전 동의를 받지 아니한다. <개정 2016. 3. 22.>
- ①재화등의 거래관계를 통하여 수신자로부터 직접 연락처를 수집한 자가 대통령령으로 정한 기간 이내에 자신이 처리하고 수신자와 거래한 것과 동종의 재화등에 대한 영리목적의 광고성 정보를 전송하려는 경우
- ②「방문판매 등에 관한 법률」에 따른 전화권유판매자가 육성으로 수신자에게 개인정보의 수집출처를 고지하고 전화권유를 하는 경우
- 2.전자적 전송매체를 이용하여 영리목적의 광고성 정보를 전송하려는 자는 제1항에도 불구하고 수신자가 수신거부의사를 표시하거나 사전 동의를 철회한 경우에는 영리목적의 광고성 정보를 전송하여서는 아니 된다.
- 3.오후 9시부터 그 다음 날 오전 8시까지의 시간에 전자적 전송매체를 이용하여 영리목적의 광고성 정보를 전송하려는 자는 제1항에도 불구하고 그 수신자로부터 별도의 사전 동의를 받아야 한다. 다만, 대통령령으로 정하는 매체의 경우에는 그러하지 아니하다.
- 4.전자적 전송매체를 이용하여 영리목적의 광고성 정보를 전송하는 자는 대통령령으로 정하는 바에 따라 다음 각 호의 사항 등을 광고성 정보에 구체적으로 밝혀야 한다.
- ①전송자의 명칭 및 연락처
- ②수신의 거부 또는 수신동의의 철회 의사표시를 쉽게 할 수 있는 조치 및 방법에 관한 사항
- 5.전자적 전송매체를 이용하여 영리목적의 광고성 정보를 전송하는 자는 다음 각 호의 어느 하나에 해당하는 행위를 하여서는 아니 된다. <개정 2024. 1. 23.>
- ①광고성 정보 수신자의 수신거부 또는 수신동의의 철회를 회피ㆍ방해하는 행위
- ②숫자ㆍ부호 또는 문자를 조합하여 전화번호ㆍ전자우편주소 등 수신자의 연락처를 자동으로 만들어 내는 행위
- ③영리목적의 광고성 정보를 전송할 목적으로 전화번호 또는 전자우편주소를 자동으로 등록하는 행위
- ④광고성 정보 전송자의 신원이나 광고 전송 출처를 감추기 위한 각종 행위
- ⑤영리목적의 광고성 정보를 전송할 목적으로 수신자를 기망하여 회신을 유도하는 각종 행위
- 6.전자적 전송매체를 이용하여 영리목적의 광고성 정보를 전송하는 자는 수신자가 수신거부나 수신동의의 철회를 할 때 발생하는 전화요금 등의 금전적 비용을 수신자가 부담하지 아니하도록 대통령령으로 정하는 바에 따라 필요한 조치를 하여야 한다.
- 7.전자적 전송매체를 이용하여 영리목적의 광고성 정보를 전송하려는 자는 수신자가 제1항 및 제3항에 따른 수신동의, 제2항에 따른 수신거부 또는 수신동의 철회에 관한 의사를 표시할 때에는 해당 수신자에게 대통령령으로 정하는 바에 따라 수신동의, 수신거부 또는 수신동의 철회에 대한 처리 결과를 알려야 한다. <개정 2024. 1. 23.>
- 8.제1항 또는 제3항에 따라 수신동의를 받은 자는 대통령령으로 정하는 바에 따라 정기적으로 광고성 정보 수신자의 수신동의 여부를 확인하여야 한다.
제 74조 (벌칙)
- 1.다음 각 호의 어느 하나에 해당하는 자는 1년 이하의 징역 또는 1천만원 이하의 벌금에 처한다. <개정 2012. 2. 17., 2014. 5. 28.>
- ①제8조제4항을 위반하여 비슷한 표시를 한 제품을 표시ㆍ판매 또는 판매할 목적으로 진열한 자
- ②제44조의7제1항제1호를 위반하여 음란한 부호ㆍ문언ㆍ음향ㆍ화상 또는 영상을 배포ㆍ판매ㆍ임대하거나 공공연하게 전시한 자
- ③제44조의7제1항제3호를 위반하여 공포심이나 불안감을 유발하는 부호ㆍ문언ㆍ음향ㆍ화상 또는 영상을 반복적으로 상대방에게 도달하게 한 자
- ④제50조제5항을 위반하여 조치를 한 자
- ⑤삭제 <2014. 5. 28.>
- ⑥삭제 <2024. 1. 23.>
- ⑦제53조제4항을 위반하여 등록사항의 변경등록 또는 사업의 양도ㆍ양수 또는 합병ㆍ상속의 신고를 하지 아니한 자
- 2.제1항제3호의 죄는 피해자가 구체적으로 밝힌 의사에 반하여 공소를 제기할 수 없다.