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[사용설명서] J’sphere ODS-H80/ J’sphere ODS-M80/ J’sphere ODS-L80
사용설명서
J’sphere ODS-H80/ J’sphere ODS-M80/ J’sphere ODS-L80
① 머리말
항상 저희 HPLC용 충전 Column J’sphere Series 를 이용해 주셔서 감사합니다.
J’sphere Series는 3종류의 ODS로 구성되어, 각각의 Ligand coverage(표면수식율)가 다릅니다.
모두 금속 불순물이 적은 4μm, 8nm Silica gel 기재를 사용하였으며, 독자적인 기술로 End-capping을 실시하였습니다. 3종류의 ODS는 고정상 표면 상태가 다르기 때문에, 분리 특성에도 차이가 있습니다.
ODS-H80: 매우 높은 소수성과 Coverage 를 가지고 있습니다. 내산·내알칼리 특성에도 뛰어납니다.
ODS-M80: ODS로서는 일반적인 소수성을 가지고 있으며, 범용성 높은 고정상입니다.
ODS-L80: ODS로서는 극히 낮은 소수성을 가지고 있습니다. YMC-Pack C8과 동일한 정도의 소수성입니다.
당사는 J’sphere Series제조에 엄격한 품질관리를 실시하고 있으며, 일정한 품질의 제품을 고객님께 전달해 드리고 있습니다. (검사 성적서 「COLUMN INSPECTION REPORT」를 참조해 주시기 바랍니다.) Column의 성능을 충분히 발휘시켜 오랫동안 사용하기 위해서 본 사용설명서를 충분히 읽으신 후 올바르게 사용해 주시기 바랍니다.
② Column연결 Type
Column 연결 Type은 제품번호 뒤에「WT」로 표시됩니다. WT= Waters Type
③ 출하시봉입용매
Acetonitrile 100%입니다. Column을 장기간 보관하는 경우에도 이 용매로 치환하여 주십시오. 완충액이나 염류를 포함한 용리액을 사용하는 경우는 염이 석출되지 않도록 치환순서에 주의해 주시기 바랍니다.
④ 용리액및시료용액
・ Flow방향은 Column 라벨에 표시된 화살표 방향입니다.
・ 수계에서 비수계 용매까지 사용할 수 있지만, 극성이 극단적으로 다른 용매간의 치환을 반복하면 Column 성능이 저하될 우려가 있습니다. 사용 가능한 일반적 유기용매는 Acetonitrile, methanol, THF 등입니다. THF 사용 시에는 PEEK 배관 등의 내용매성에 주의하여 주십시오
・ 용리액을 치환하는 경우에는 유기용매간의 혼화성과 염 석출에 충분히 주의해 주십시오. 또, 시료나 시료 용해 용매에 포함되는 염류가 Column내에서 석출 되지 않도록, 용리액의 혼화성을 확인한 후 주입하여 주십시오
・ 용리액은 pH2.0 ~ 7.5 범위 내에서 조제하여 주십시오. 단, ODS-H80는 pH1.0 ~ 9.0 범위내에서 사용하여 주십시오.
・ pH한계부근에서는 10%이상의 유기용매를 포함하는 용리액을 사용하여 주십시오. pH한계부근에서는 온도나 용리액 조성 등 조건에 따라 Column 수명이 짧아지는 경우가 있습니다.
・ 사용 후에는 봉입용매로 치환하여 주십시오.
⑤ Column 세정(일반적방법)
・ 용리액이 완충액이나 염류가 포함하지 않는 경우는 용리액을 구성하는 유기용매의 농도를 높여 Column 에 잔존력이 큰 물질을 세정해 주십시오. 유기용매는100%까지 사용하실 수 있습니다. 특히 지용성이 높은 성분이 흡착하고 있는 경우, THF를 첨가하면 효과적인 경우도 있습니다.
・ 완충액이나 염류를 포함한 용리액을 사용하시는 경우에는 이것이 포함되지 않은 물/유기용매 혼합액(용리액과 동등 비율)로 치환한 후, 위와 같이 세정해 주십시오. 50 mM정도의 완충액이나 염류일 경우, 약60% Acetonitrile 수용액으로 직접 치환할 수 있습니다.
・ pH한계부근에서 사용 후 물로만 세정하시는 경우, Column열화를 일으키는 경우가 있습니다. 물/유기용매 혼합액이나60% Acetonitrile 수용액으로 세정해 주십시오.
・ 단백질이나 다당류 등의 고분자 화합물이 Column에 흡착했을 경우, 세정으로 제거하기는 어렵습니다. 이러한 것들이 포함된 시료나 협잡물이 많은 시료의 경우, 미리 고상추출법(SPE: Solid Phase Extraction) 등의 전처리(Clean up)를 추천 드립니다.
⑥ 그외환경
・ Column 압력은 길이 150mm이하가 20 MPa, 250 mm는 25 MPa, 75 mm는 10 MPa 정도를 상한으로 하여 주십시오. 단, 내경이 10 mm이상의 Column은 10 MPa 정도를 상한으로 해주시기 바랍니다. 분취를 전제로 내경이 작은 Column으로 분리조건을 검토하는 경우에는, 가능한 저유속으로 하시는 것이 분취 Column으로 이행하기 쉽습니다. 압력 상한을 넘는 경우에는 유속을 조정하여 주십시오.
・ 시료주입을 반복하면 Column 압력이 상승하는 경우가 있습니다. 시료는 미리 YMC Duo-Filter (0.2μm) 등에서 여과시켜 주십시오. 또한 Column Frit 이 막힐 수 있는 시료는 Pre Column Filter (XRPRCS01)를 사용하여 주십시오.
・ Column 온도는 50℃를 상한으로 해주시되, 용리액의 pH 등 조건에 따라 Column 수명에 영향을 주는 경우가 있습니다. 통상적으로 20℃~40℃ 사이에서 사용하여 주십시오.
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