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Semi Micro Column을 사용할 때에는?
생체 시료의HPLC분석에서는, 대상 성분에 따라서복잡한 시료조제가필요한 경우가 많습니다.
이 때문에주입시료를 미량 밖에 얻지 못하는 경우가 있습니다.일반적으로이용되고 있는
내경4.6mm의분석 Column에극미량의시료를주입하면 Column 내에서시료의 확산으로
목적성분이 Peak로검출되지 않을 수도 있습니다.이러한미량성분의검출에는내경이작은
Semi Micro Column이 대체가 될 수 있습니다.또,낮은 유속으로 분석을 실시할 수 있으므로
이동상용매를 절약할 필요가있는 경우나LC/MS에적용하는 경우에도유익합니다.
이렇게유용성이 큰 Semi micro Column이지만사용하는데 있어서 몇 가지 주의할 것이 있습니다.
그 중 하나는 Column성능에 영향을미치는 요인으로서검출기의 플로우셀을 포함한배관계통의 데드볼륨이들 수 있습니다.
아래 그림에배관의내경및플로우셀의용량이 Chromatogram에미치는영향을나타냈습니다.
보통사이즈의분석컬럼에 사용되는배관에서는시료가 Column외부확산이커지는 만큼 Column성능
(이론단수,피크대칭)의저하가일어날 수 있습니다. Semi micro Column을사용하려면배관시스템에
의한시료확산을억제할 필요가있습니다. 또한편으로는플로우셀용량이작아지면셀광로의 길이도 짧기
때문에 Peak 높이가 낮아지는 것도유의해야 합니다.
이상의 점을 고려해분리에적합한컬럼성능과검출감도를얻기 위해시스템환경을 조율하는 것이 중요합니다.
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