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이동상에 대해
이동상에 대해
HPLC분석에서 데이터의 추적을 할 수 없을 때는 컬럼에 원인이 있다고 생각하기 쉽지만 장치의 관리 부족 등 컬럼 이외에 원인이 있는 경우도 많습니다. 본 포스트에서는 사용하는 용매의 그레이드의 차이가 피크 형상에 영향을 미치는 예를 소개합니다. 아세토나이트릴/물을 이동상으로 염기성 화합물을 분석한 크로마토그램을 나타냅니다. 피크 2가 염기성 화합물입니다.
Figure 1은 HPLC용 아세토나이트릴을 Figure 2는 특급 아세토나이트릴을 사용한 경우입니다. 그 외의 다른 조건은 동일하게 진행하였습니다. HPLC용 아세토나이트릴에서는 브로드한 피크 형상이 특급 아세토나이트릴에서는 양호하게 되어 있습니다. 또, 특급 아세토나이트릴에서는 메이커에 따라서도 피크 형상에 차이가 보였습니다. 이런 차이의 원인은 아세토나이트릴에 포함되는 미량의 불순물이 이동상에 첨가하는 염과 같은 기능을 하고 있기 때문이라고 볼 수 있습니다.
이동상을 아세토나이트릴/5mM초산암모늄으로 변경하면, 특급, HPLC용 어떤 아세토나이트릴을 사용해도 Figure 2와 같은 크로마토그램을 얻을 수 있었습니다.
이러한 용매의 그레이드의 차이 영향을 피하기 위해 HPLC용 용매를 사용할 필요가 있습니다. 또한, 해리작용기를 가진 화합물도 산이나 염을 포함하지 않는 이동상에서 분석할 수 있는 경우도 있지만, 재현성을 중시하는 경우는 염 등을 포함한 이동상을 사용하는 것이 좋습니다.
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