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시료를 녹이는 용매에 대해
시료를 녹이는 용매에 대해
HPLC에서시료는이동상에 녹이는 것이 기본이지만,시료의가용성이나 전처리등의 문제 때문에,반드시 이동상에 녹일 수 없는 경우도있습니다. 이 때,이동상과 시료용해용매에서용매강도의차이나pH의차이가커서, 피크 갈라짐과피크가브로드해지는 등의문제가일어날 수 있습니다.이 현상은시료용매가 컬럼 내에서일시적으로 이동상과치환되면서시료가확산되거나해리상태가 변화하기 때문에일어나는 현상이라고 생각됩니다.
이런 문제가일어났을 경우의해결 방법을 소개합니다.크로마토그램(A)는 물에용해한시료를2㎕ 주입한 것으로, 피크1에숄더가생기고 있습니다.시료용액의pH와 이동상의pH가달랐기 때문에 이시료를 이동상에서2배로희석하고pH의차이를줄인후4㎕주입하면크로마토그램(B)와 같이 피크형태는개선되었습니다.
이와 또 다른해결방법은시료의주입량을줄이고,시료용액을용매강도가작은용매로 희석하는 방법 등이있습니다.피크 이상이 보이면,시료용액을 확인하고,이동상과 다른경우에는 시료용액에 대해 검토해 주세요.
관련 영상 ; https://youtu.be/Jmslm58Caco
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