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이동상의 pH설정
이동상의 pH설정
역상HPLC에서이온성화합물을분석하는 경우, 산이나완충용액에서 이동상의pH조정을 시행합니다.
그러나화합물에 대해부적절한pH범위에서 분석을행하면피크균열이나브로드(Broad)한 피크등의트러블을 일으키는경우가있습니다. 또, 피크형상에 문제가 없는 경우에도머무름 시간의 재현성이 떨어지는 경우도 있습니다.
아래그래프는벤조산의 리텐션(retention)과 용리액의pH의관계를나타내고 있습니다.용리액의pH가2에서3.5의범위에서는k'의변화가비교적작은 것에 대해pH 3.5에서4.5에서는 크게변화하고 있습니다.벤조산의pKa는4.2이고pKa부근에서k'의변화가큰 것으로 나타납니다.용리액의pH를이런k'의변동이 큰pKa부근에설정하면용리액pH의작은오차가분리에 영향을 주고재현성있는결과를 얻지 못할 가능성이 있습니다.실제로용리액의pH가0.1이 틀어져도 분리에영향을 미치는 것도 있습니다. 따라서분석조건을설정할 때용리액의pH는pKa에서1이상 떨어진 곳에설정하는 것이 바람직합니다. pKa가모를경우는용리액의pH와 머무름 시간과의관계를충분히검토하고,용리액pH가분리에 대한영향이 작은 곳에설정하도록 해야합니다.
검토과정에서는 분석조건으로설정하려고 하는pH부근에서pH를 미세 조정한 용리액몇 가지를 바꾸어서 분리에 대한영향의유무를확인하는 것도 중요합니다.
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